了解毛細管電泳儀的工作原理
更新時(shí)間:2022-06-20 點(diǎn)擊次數:2767
毛細管電泳儀是一類(lèi)以毛細管為分離通道、以高壓直流電場(chǎng)為驅動(dòng)力的新型液相分離技術(shù)。實(shí)際上包含電泳、色譜及其交叉內容,它使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平,并使單細胞分析,乃至單分子分析成為可能。毛細管電泳儀是根據在電解質(zhì)溶液中,帶電粒子在高壓電場(chǎng)作用下,以不同的速度定向遷移的現象來(lái)達到組分分離的目的。各組分分離后通過(guò)檢測器進(jìn)行檢測,并根據各組分的遷移時(shí)間和響應值進(jìn)行定性、定量分析。
工作原理:
毛細管兩端分別浸入緩沖液中,而緩沖液中分別插入連有高壓電源的電極,根據被分離物之間電荷和體積的不同,帶電荷分子朝相反極性的電極方向移動(dòng)。又利用毛細管內壁上的電荷和應用的勢能而引起的電解質(zhì)移動(dòng),毛細管內表面帶有硅羥基基團,當毛細管內充滿(mǎn)緩沖溶液時(shí),毛細管壁上的硅羥基發(fā)生解離,生成氫離子溶解在溶液中,這樣就使毛細管壁上形成雙電層,管壁是負電荷層,溶液是正電荷層。在毛細管的兩端加上直流電場(chǎng)后,帶正電的溶液就會(huì )整體向負極的一端移動(dòng),形成了電滲流。無(wú)論是帶正電、帶負電或不帶電的粒子,都在電滲流的作用下,向陰極遷移,帶正電的,受到同方向的電場(chǎng)力作用,遷移快,不帶電的遷移速度次之,帶負電的遷移速度慢,從而實(shí)現各蛋白組分的分離。